Validan método para determinación de fructosa en plasma seminal humano

La evaluación de la calidad del semen humano y su capacidad de fertilización, por tanto, no sólo requiere un análisis cualitativo y cuantitativo de los espermatozoides, sino también los análisis bioquímicos del plasma seminal. Se ha desarrollado una determinación fotométrica rápida, simple, específica y cuantitativa de la fructosa seminal mediante la hexoquinasa y la fosfoglucosa-isomerasa usando un analizador semi-automatizado bicromático.

Los bioquímicos médicos en el Hospital Universitario Merkur (Zagreb, Croacia) utilizaron muestras de semen sobrantes de los hombres a quienes les habían practicado una evaluación de rutina de la fertilidad con edades comprendidas entre 28 a 41 años, con los parámetros seminales normales en su estudio. Ningún material de control de calidad comercial estaba disponible, por lo que se usaron dos acumulados de plasma seminal, para el control de calidad interno, obteniéndose coeficientes de variación de 0,85% y 1,06% para los valores normales y patológicos, respectivamente. El objetivo de este estudio fue validar el desempeño del método enzimático para la fructosa en plasma seminal en un analizador AU400 (BC) (Olympus Mishima, Sunto-gun, Japón), así como para desafiar el desempeño del método en cuanto a calidad.

La determinación de la fructosa en el plasma seminal por el método enzimático se lleva a cabo indirectamente a través de la glucosa. Después de la fosforilación de la fructosa con hexoquinasa, la fructosa 6-fosfato resultante se convierte en glucosa 6-fosfato a través de la fosfoglucosa isomerasa. La glucosa 6-fosfato se oxida adicionalmente por la glucosa 6-fosfato deshidrogenasa, obteniéndose 6-fosfogluconato y nicotinamida adenina dinucleótido (NADH). La cantidad de NADH formado es estequiométrica con respecto a la cantidad de D-fructosa y D-glucosa, por lo que la velocidad medida de la formación de NADH refleja cuantitativamente la cantidad de glucosa y es equivalente a la cantidad de fructosa en el plasma seminal.

Los investigadores inicialmente compararon 43 muestras de plasma seminal en toda la gama de linealidad de 0,37 a 24,7 mmol/L. La fructosa también se midió en 20 muestras de plasma seminal obtenidas de voluntarios sanos sin problemas de fertilidad, para confirmar los intervalos de referencia, previamente establecidos, de 8,3 a 27,8 mmol/L. Todas las muestras dieron mediciones dentro del intervalo de referencia y los resultados fueron de 8,8 a la 23,6 mmol/L.

Los autores concluyeron que los resultados de este estudio de verificación mostraron que la determinación enzimática automática de fructosa en el plasma seminal, en un analizador BC AU400, cumplía con las especificaciones de calidad deseables y los requisitos para la acreditación de acuerdo con la norma ISO 15189, proporcionando de este modo un método de diagnóstico fiable para la evaluación clínica de la infertilidad masculina. El estudio fue publicado en la edición de julio de 2016 de la revista Journal of Applied Laboratory Medicine.

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Olympus Mishima

Merkur University Hospital