Inmunoanálisis multiplex permiten la cuantificación de antígenos de la malaria

El estándar de atención para el diagnóstico de la malaria es la microscopía de frotis de sangre y la detección de antígenos a través de una prueba de diagnóstico rápido (PDR). La microscopía tiene limitaciones en términos de dificultad para identificar infecciones mixtas y las PDR son más adecuadas para el diagnóstico de la malaria en entornos con una infraestructura de laboratorio limitada.

Las plataformas de inmunoensayo que detectan simultáneamente los antígenos de la malaria, incluida la proteína 2 rica en histidina (HRP2)/HRP3 y la deshidrogenasa láctica de Plasmodium (pLDH), son herramientas epidemiológicas útiles para la evaluación de pruebas de diagnóstico rápido. El estándar de oro para la detección de la malaria es la confirmación de la presencia de ADN o ARN del parásito en sangre total mediante la prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

Un equipo de científicos médicos, dirigido por los del Grupo de Diagnóstico, PATH (Seattle, WA, EUA), estudió la evaluación comparativa de dos plataformas multiplex para identificar Plasmodium falciparum con presencia o ausencia de expresión de HRP2/HRP3 como indicativo de deleciones de hrp2/hrp3 y otras especies de Plasmodium .

El equipo utilizó un panel de muestras de 77 miembros, compuesto por estándares internacionales de antígenos de Plasmodium de la Organización Mundial de la Salud (OMS, Ginebra, Suiza), parásitos cultivados para P. falciparum y Plasmodium knowlesi, y muestras clínicas con monoinfecciones por P. falciparum , Plasmodium vivax y Plasmodium malariae se generaron para análisis como muestras de sangre total y de sangre seca (DBS).

Los ensayos para HRP2, pLDH específica de P. falciparum (Pf LDH), pLDH específica de P. vivax (PvLDH) y todas las especies de Plasmodium humano pLDH de Pan malaria (PanLDH) en el Human Malaria Array Q-Plex (Quansys Biosciences, Logan , UT, EUA) y las plataformas xMAP (Luminex, Austin, TX, EUA) fueron evaluados con estos paneles.

Los investigadores informaron que el xMAP mostró un mayor porcentaje de concordancia positiva para la identificación de especies de P. falciparum con eliminación de hrp2 y Plasmodium en sangre total y DBS que el Q-Plex. Para las muestras de sangre total, hubo una correlación altamente positiva entre las dos plataformas para PfLDH y PvLDH, una correlación positiva moderada para HRP2 y una correlación pobre para PanLDH. El ensayo xMAP HRP2 pareció tener una reacción cruzada con HRP3, mientras que el Q-Plex no lo hizo. El ensayo Q-Plex Pf LDH presentó una reacción cruzada con P. malariae, mientras que el xMAP no lo hizo. Para ambas plataformas, se detectó P. knowlesi en el ensayo PvLDH. Los estándares internacionales de la OMS permitieron la normalización, en ambas plataformas, de sus ensayos HRP2, Pf LDH y Pv LDH en sangre total y DBS.

Los autores concluyeron que Q-Plex y xMAP muestran una buena concordancia para la identificación de mutantes de P. falciparum con deleciones hrp2/hrp3 y otras especies de Plasmodium. Los resultados cuantitativos de ambas plataformas, normalizados en unidades internacionales para HRP2, PfLDH y PvLDH, mostraron una buena concordancia y deberían permitir la comparación y el análisis de los resultados generados por cualquiera de las plataformas. El estudio fue publicado el 7 de junio de 2022 en la revista Malaria Journal.

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