Utilizamos cookies para comprender de qué manera utiliza nuestro sitio y para mejorar su experiencia. Esto incluye personalizar el contenido y la publicidad. Para más información, Haga clic. Si continua usando nuestro sitio, consideraremos que acepta que utilicemos cookies. Política de cookies.

Presenta Sitios para socios Información LinkXpress hp
Ingresar
Publique su anuncio con nosotros
INTEGRA BIOSCIENCES AG

Deascargar La Aplicación Móvil




Desarrollan nueva herramienta para el diagnóstico de la infección crónica por el VHB

Por el equipo editorial de LabMedica en español
Actualizado el 29 Oct 2019
Print article
Imagen: Diagrama de flujo de trabajo para la coamplificación con una PCR de temperatura de desnaturalización inferior (COLD-PCR)/análisis de fluorescencia de la curva de fusión (FMCA) (Fotografía cortesía del Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Fujian).
Imagen: Diagrama de flujo de trabajo para la coamplificación con una PCR de temperatura de desnaturalización inferior (COLD-PCR)/análisis de fluorescencia de la curva de fusión (FMCA) (Fotografía cortesía del Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Fujian).
Un equipo de investigadores chinos describió el desarrollo de una herramienta nueva y poderosa para el diagnóstico y el tratamiento de la infección crónica por el virus de la hepatitis B (VHB).

Los métodos utilizados actualmente para diagnosticar y controlar la infección crónica por hepatitis B (ICHB) se basan en su mayoría en análisis del ADN de VHB, tanto dinámico como en tiempo real, el genotipo y el análisis de mutación de la transcriptasa inversa (RT). Sin embargo, los métodos utilizados para realizar estos análisis tienen la limitación de la poca sensibilidad o la incapacidad para detectar más de una mutación a la vez. Otros métodos son demasiado engorrosos o caros para uso clínico.

Los investigadores de la Universidad Médica de Fujian (República Popular de China) mejoraron esta situación al establecer una coamplificación altamente sensible para una PCR de temperatura de desnaturalización más baja (COLD-PCR), acoplada con el análisis de la curva de fusión con fluorescencia basada en la sonda (FMCA) para el diagnóstico preciso de los pacientes con ICHB.

COLD-PCR (coamplificación a una temperatura de desnaturalización más baja-PCR) es un protocolo modificado de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que enriquece los alelos variantes de una mezcla de ADN con mutaciones y de tipo salvaje. La capacidad de amplificar e identificar preferentemente los alelos minoritarios y las mutaciones somáticas de ADN de bajo nivel en presencia de alelos de tipo salvaje en exceso es útil para la detección de mutaciones.

El análisis de la curva de fusión es una evaluación de las características de disociación del ADN bicatenario durante el calentamiento. A medida que se eleva la temperatura, la doble cadena se comienza a disociar, lo que conduce a un aumento de la intensidad de la absorbancia, la hipercromacidad. La temperatura a la que se desnaturaliza el 50% del ADN se conoce como temperatura de fusión. La información recopilada se puede usar para inferir la presencia e identidad de las mutaciones de los polimorfismos de un solo nucleótido (SNP).

Se demostró que el método COLD-PCR/FMCA era capaz de detectar el ADN del VHB, los genotipos y las mutaciones RT, simultáneamente. Se evaluó sistemáticamente el desempeño analítico de este método, incluida la imprecisión, la exactitud, la sensibilidad, los límites de detección, el intervalo lineal y su capacidad para detectar variantes menores.

Los resultados revelaron que el método COLD-PCR/FMCA podía detectar mutaciones del VHB a concentraciones mucho más bajas que otras técnicas como la secuenciación PCR/FMCA o la secuenciación PCR Sanger (1% frente a 10% frente a 20%, respectivamente). La nueva técnica también podía diferenciar las distintas fases de la infección por el VHB de acuerdo con la proporción y el tipo de mutaciones, así como mediante la detección del ADN del VHB.

“Las guías han confirmado que la monitorización dinámica del ADN del VHB, los genotipos y el ADN mutante de la transcriptasa inversa (RT), es de gran importancia para evaluar el estado de la infección, predecir la progresión de la enfermedad y juzgar la eficacia del tratamiento en pacientes infectados con el VHB”, dijo el autor principal, el Dr. Qishui Ou, investigador en medicina de laboratorio en el primer hospital afiliado de la Universidad de Medicina de Fujian. “Creemos que COLD-PCR/FMCA proporciona una poderosa herramienta de laboratorio para el diagnóstico y tratamiento precisos de los pacientes infectados con el VHB”.

“Nuestro objetivo era establecer un método más práctico y económico y con alta sensibilidad para detectar el genotipo y las mutaciones RT y al mismo tiempo detectar el ADN del VHB”, dijo el Dr. Ou. “Hasta ahora no había enfoques de alto rendimiento para detectar el ADN del VHB, el genotipo y las mutaciones RT simultáneamente. Por lo tanto, es necesario establecer un método más práctico y económico con alta sensibilidad para detectar el genotipo y las mutaciones RT mientras se detecta el ADN del VHB. COLD-PCR/FMCA tiene ese potencial”.

El estudio se publicó en la edición en línea del 10 de octubre de 2019 de la revista Journal of Molecular Diagnostics.

Enlace relacionado:
Universidad Médica de Fujian

New
Miembro Oro
Veterinary Hematology Analyzer
Exigo H400
Miembro Oro
ANALIZADOR DE GASES EN SANGRE
GEM Premier 7000 with iQM3
New
Hepatitis B Test
OnSite HBsAg Rapid Test
New
DVT/PE Test
VIDAS D-DIMER EXCLUSION II

Print article

Canales

Diagnóstico Molecular

ver canal
Imagen: una sección de resonancia magnética coronal muestra una lesión de ultrasonido enfocada de alta intensidad en el tálamo izquierdo del cerebro (foto cortesía del UT Southwestern Medical Center)

Biomarcadores de ACV recientemente identificados abren camino a análisis de sangre para diagnosticar rápidamente lesiones cerebrales

Cada año, casi 800.000 personas en los EUA sufren un accidente cerebrovascular, que ocurre cuando el flujo sanguíneo a áreas específicas del cerebro es insuficiente, lo que... Más

Inmunología

ver canal
Imagen: el descubrimiento de biomarcadores podría mejorar el tratamiento del cáncer de endometrio (foto cortesía del Monte Sinai)

Simple análisis de sangre ayudaría a elegir mejores tratamientos para pacientes con cáncer de endometrio recurrente

El cáncer de endometrio, que se desarrolla en el revestimiento del útero, es el cáncer ginecológico más frecuente en los Estados Unidos y afecta a más de 66.... Más

Patología

ver canal
Imagen: a medida que las células tumorales fluyen a través de estas cámaras microfluídicas, se someten a un aumento del estrés cortante y se clasifican en función de su fuerza de adhesión (foto cortesía de UC San Diego)

Dispositivo microfluídico evalúa adherencia de células tumorales para predecir propagación del cáncer

El carcinoma ductal in situ (CDIS), un tipo de cáncer de mama en etapa temprana, a menudo se denomina cáncer de mama en etapa cero. En muchos casos, permanece inofensivo y no se propaga más... Más
Copyright © 2000-2025 Globetech Media. All rights reserved.