Prueba de PCR sensible detecta la enfermedad de Lyme en etapa temprana

El tratamiento exitoso de la enfermedad de Lyme (EL) depende de un diagnóstico exacto. Sin embargo, los ensayos actuales de detección en el laboratorio carecen de sensibilidad en las primeras etapas de la enfermedad. Dado que el diagnóstico tardío de EL puede resultar en altos costos de atención médica y un gran sufrimiento para el paciente, se necesitan nuevas pruebas altamente sensibles.

En este sentido, los investigadores de la Universidad de Leicester (Reino Unido), desarrollaron una prueba de PCR cuantitativa controlada internamente dirigida contra el gen de la subunidad grande de la terminasa multicopia (terL), codificado por profagos, que solo se encuentran en bacterias causantes de EL. Un profago es un genoma de bacteriófago insertado e integrado en el cromosoma circular del ADN bacteriano o presente como un plásmido extracromosómico. Esta es una forma latente de un fago, en la que los genes virales están presentes en la bacteria sin causar la alteración de la célula bacteriana.

La prueba Ter-qPCR recientemente desarrollada se basó en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), que amplifica pequeñas cantidades de material genético específico para que sea detectable. Para aumentar la sensibilidad de la prueba para la detección de Borrelia burgdorferi, el agente causante de la enfermedad de Lyme, los investigadores la adaptaron para que fuera específica para el gen del profago terL. La proteína terL ayuda a los fagos a empaquetar su ADN.

El potencial diagnóstico de la prueba Ter-qPCR se evaluó utilizando un conjunto de muestras de sangre y suero recolectadas de voluntarios sanos e individuos que fueron diagnosticados clínicamente con la enfermedad de Lyme. Los resultados revelaron que el límite de detección de la prueba Ter-qPCR se estimó en 22 copias, el equivalente a una célula bacteriana en una muestra de sangre enriquecida con bacterias. Además, se observaron diferencias cuantitativas significativas en términos de la cantidad de terL detectada en individuos sanos y pacientes con enfermedad de Lyme, temprana o tardía.

“El diagnóstico temprano de la enfermedad de Lyme es absolutamente vital para reducir el sufrimiento, porque el Lyme temprano es tratable, pero el Lyme tardío es muy difícil de tratar”, dijo el primer autor, el Dr. Jinyu Shan, investigador del departamento de ciencias respiratorias de la Universidad de Leicester. “Las pruebas actuales normalmente no pueden detectar el bajo número de bacterias en las muestras de sangre de pacientes en etapa temprana. Nuestro objetivo era diseñar una prueba altamente sensible para ayudar a los médicos a identificar la enfermedad de Lyme lo antes posible. Actualmente trabajamos con un socio comercial e investigamos aspectos regulatorios y la posibilidad de un ensayo clínico para esta tecnología”.

La prueba Ter-qPCR se describió en la edición digital del 15 de marzo de 2021 de la revista Frontiers in Microbiology.

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Universidad de Leicester